常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒產(chǎn)品貨號(hào):YM-RY2024由上海樊克生物公司提供:常規(guī)考馬斯亮藍(lán)染色液 主要用于:考馬斯亮藍(lán)染色凝膠 產(chǎn)品組成及特殊說(shuō)明:主要由R-250、乙酸組成。
貨號(hào): YM-RY2024
供應(yīng)商: 上海樊克生物
數(shù)量: 10
保質(zhì)期: 12個(gè)月
保存條件: -20℃下,避光
規(guī)格: L/ml
保存條件:
室溫避光保存,至少一年有效。
注意事項(xiàng):
特別注意:Nissl染色液的染色能力很強(qiáng),并且染色后很難去除,請(qǐng)注意勿使染色液沾染皮膚和衣物等。
需自備4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理,還需自備二甲苯,中性樹(shù)膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片,需自備90%乙醇,無(wú)水乙醇以及二甲苯。
樣品數(shù)量較多時(shí),可以使用我公司生產(chǎn)的染色架和染色缸,便于操作。
次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)。
考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒(常規(guī)法)關(guān)鍵詞:考馬斯亮藍(lán)染色試劑盒
Western一抗二抗去除液(Stripping buffer),用于Western中轉(zhuǎn)移了蛋白的膜的重復(fù)利用。在Western中完成了一抗二抗結(jié)合和后續(xù)的化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后,有時(shí)還需要檢測(cè)tubulin、actin等表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定的蛋白作為參照,或檢測(cè)其它蛋白進(jìn)行比較。通過(guò)使用一抗二抗去除液,充分去除一抗二抗,可以非常方便地重新利用使用過(guò)的膜檢測(cè)其它蛋白。和重新跑一個(gè)SDS-PAGE膠相比,不僅省時(shí)省力,而且可以消除重新上樣而帶來(lái)的誤差,使可比性更強(qiáng)。
使用Western一抗二抗去除液多次重復(fù)使用同一張膜,會(huì)導(dǎo)致蛋白信號(hào)的減弱。但是,本W(wǎng)estern一抗二抗去除液,經(jīng)過(guò)多個(gè)抗體的檢測(cè)試驗(yàn),通常可以重復(fù)利用膜3-5次。
使用本試劑只需大約20-30分鐘即可實(shí)現(xiàn)蛋白膜的重復(fù)使用,然后可以進(jìn)行封閉等后續(xù)的Western操作。
不同的Western一抗二抗去除液主要在去除結(jié)合的一抗二抗的原理方面略有不同。分別依靠去垢劑、酸性、堿性、還原劑、螯合劑、鹽濃度以及一些特殊試劑等的不同組合來(lái)解除一抗二抗的結(jié)合,同時(shí)又不會(huì)導(dǎo)致轉(zhuǎn)移到膜上的蛋白的損失。
保存條件:
4℃保存,一年有效。長(zhǎng)時(shí)間不使用可以-20℃保存。
注意事項(xiàng):
使用辣根過(guò)氧化物酶(HRP),任何封閉(blocking)都應(yīng)當(dāng)使用5%脫脂牛奶,如果使用堿性磷酸酯酶,任何封閉都應(yīng)當(dāng)使用酪蛋白(casein)。
為取得效果,推薦使用PVDF膜。但硝酸纖維素膜也可以使用本W(wǎng)estern一抗二抗去除液。
使用ECL、BeyoECL等類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè)適用本試劑。使用非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的Western檢測(cè), 例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。
本W(wǎng)estern一抗二抗去除液有輕微腐蝕性,使用時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)。
使用說(shuō)明:
1. 在完成Western化學(xué)發(fā)光檢測(cè)后,蒸餾水中漂洗5分鐘。
2. 棄蒸餾水,加入適量的Western一抗二抗去除液(弱堿性),至少需把膜完全覆蓋。在搖床上漂洗10分鐘。
3. 棄Western一抗二抗去除液(弱堿性),并吸盡殘余液體。加入TBS、TBST或PBS漂洗3次,每次在搖床上漂洗3-5分鐘。
4. 進(jìn)行封閉(blocking)等Western的后續(xù)操作。
溫馨提示:不可用于臨床治療。





